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多肽合成檢測方法

多肽合成檢測方法
UV Monitor
  在多肽合成儀中,在線檢測耦合效果的裝置,如UV Monitor往往是選配裝置,客戶可根據(jù)實驗的需要選購。其功能是讓操作者直觀的看到多肽合成的每一部氨基酸偶聯(lián)效果,從而針對特定的序列做合成設(shè)置的調(diào)整,*終達(dá)到*佳合成效果。
  對于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來說,UV Monitor是相當(dāng)重要的。
  試劑檢測:沒有選購在線檢測附件的多肽合成儀用戶,也可以采用試劑檢測方法做基本的耦合效果測定實驗。
  固相多肽合成中,主要是通過檢測樹脂上游離氨基來判斷連接效率,檢測方法稱為Kaiser方法,其檢測結(jié)果,如果有游離氨基的時候,顯示蘭色,或紅褐色(pro,ser,His)。
  Kaiser試劑包括:A,6% 茚三酮的乙醇溶液;B,80% 苯酚的乙醇溶液;C,2% 0.001M KCN的吡啶溶液
  配制中的吡啶需要經(jīng)過茚三酮處理后,重蒸后再使用。檢測過程,取少量樹脂,加入A,B,C各2-3滴,100℃下加熱1-2min,如果溶液有蘭色,或樹脂出現(xiàn)蘭色,紅褐色,表明還有游離氨基,否則說明連接完全。
  其它檢測游離氨基的方法:三硝基苯磺酸法,苦味酸法,溴芬蘭法等

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